视网膜被认为是CNS的一个部分,斑马鱼视网膜对重金属高度敏感。持续的光照和刺激强度会影响斑马鱼视网膜健康。除此之外，铁会导致斑马鱼视网膜损伤,甚至可诱导视网膜细胞死亡。某些重金属，如镉（Cd），可以引起斑马鱼眼部毒性效应和行为异常。金属暴露可能会干扰斑马鱼幼鱼视网膜的正常发育，进而影响其视觉功能。
在视网膜细胞凋亡（通过TUNEL染色检测）和细胞增殖（通过BrdU标记检测）方面，可以评估光照强度和持续时间对鱼类视网膜健康的影响。在每次进行光处理实验之前，鱼类首先被放置在持续的黑暗环境中生活7天，以便适应黑暗条件。
光源和强度：实验中使用了一个500瓦的钨卤素灯，放置在距离2.5加仑玻璃水族箱侧面50厘米的地方，以产生强烈的白光条件。使用手持式照度计测量光照强度，在水族箱玻璃表面面向光源的一侧测量到的光照强度为20,000lux，在光线穿过水和两层水族箱玻璃后，光照强度为11,000lux。
光照距离调整：为了控制水温，2小时后将灯具再移动30厘米远离水族箱（此时水族箱玻璃表面的光照强度为8000lux，光线穿过水族箱后的光照强度为5000lux），以防止水温上升超过32.5°C。
环境条件：光处理实验在一个大型、通风良好的房间中进行，以帮助散发卤素灯产生的热量。
光照处理后的处理：经过7天的持续光照处理后，鱼类被放回到标准的设施光照和温度条件下。
视网膜实验：在进行视网膜末端脱氧核糖核酸转移酶（TdT）介导的缺口末端标记（TUNEL）和溴脱氧尿苷（BrdU）标记实验时，会在较短的持续光照处理后检查鱼类的眼睛。对照组：所有实验中，持续光照处理前的对照组眼睛取自在持续黑暗中饲养了7天的鱼类。
将性成熟的斑马鱼按雌雄比例2︰3置于产卵盒,隔板避光过夜。次日取出隔板,在光照刺激下交配产卵。通过预实验3次生物性重复后确定0、0.2、0.4、0.8、1.6mg·L-1 5个氯化镉暴露浓度组。将受精后6h发育正常的斑马鱼胚胎置于150mm细胞培养皿中(200卵·皿-1),分别加入不同浓度氯化镉后加盖封闭,于28.5℃恒温光照培养箱中培养,每24h更换一次液体。
斑马鱼幼鱼眼长与身长比值为比较各组斑马鱼幼鱼眼睛形态之间的差异。各组取24条120hpf幼鱼后,通过体式显微镜拍照并测量幼鱼眼睛与身体长度。身体长度为从头部顶端到躯干末端(不包括尾鳍)的长度;眼睛长度为眼睛长轴前部至后部的长度。分别计算不同暴露组幼鱼的眼睛长度和身体长度的比值。
氯化镉暴露对斑马鱼的影响具有浓度依赖性, 0.8mg·L-1氯化镉暴露组就可导致120hpf斑马鱼幼鱼致死、致畸效应较强。且氯化镉暴露组斑马鱼幼鱼眼长/身长比值会显著降低。
唐颖,,彭星宇,等.氯化镉对斑马鱼幼鱼视网膜发育的影响[J].生态毒理学报,2023,18(03):418-429.
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